{"id":163824,"date":"2022-08-05T19:06:02","date_gmt":"2022-08-05T21:06:02","guid":{"rendered":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/?p=163824"},"modified":"2022-08-05T19:06:02","modified_gmt":"2022-08-05T21:06:02","slug":"criometria","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/ciencias-da-natureza\/quimica\/criometria","title":{"rendered":"Criometria"},"content":{"rendered":"<p><strong>Criometria &#8211; O que \u00e9<\/strong><\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria<\/strong>\u00a0\u00e9 a medi\u00e7\u00e3o do n\u00famero e caracter\u00edsticas das c\u00e9lulas.<\/p>\n<p>As vari\u00e1veis que podem ser medidas por m\u00e9todos citom\u00e9tricos incluem tamanho celular, contagem de c\u00e9lulas, morfologia celular (forma e estrutura), fase do ciclo celular, conte\u00fado de DNA e a exist\u00eancia ou aus\u00eancia de prote\u00ednas espec\u00edficas na superf\u00edcie celular ou no citoplasma.<\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria\u00a0<\/strong>\u00e9 usada para caracterizar e contar c\u00e9lulas sangu\u00edneas em exames de sangue comuns, como o hemograma completo.<\/p>\n<p>De maneira semelhante, a\u00a0<strong>citometria<\/strong>\u00a0tamb\u00e9m \u00e9 usada na pesquisa de biologia celular e em diagn\u00f3sticos m\u00e9dicos para caracterizar c\u00e9lulas em uma ampla gama de aplica\u00e7\u00f5es associadas a doen\u00e7as como c\u00e2ncer e AIDS<\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria<\/strong>\u00a0envolve uma ampla gama de t\u00e9cnicas de ponta, a maioria das quais mede as propriedades moleculares das c\u00e9lulas empregando marca\u00e7\u00e3o fluorescente para detectar ant\u00edgenos espec\u00edficos usando anticorpos, \u00edons intracelulares usando corantes indicadores, mol\u00e9culas rep\u00f3rter fluorescentes como prote\u00edna fluorescente verde e DNA e RNA usando sondas espec\u00edficas de \u00e1cido nucleico.<\/p>\n<p>Outros sinais \u00f3pticos tamb\u00e9m podem ser medidos, incluindo dispers\u00e3o de luz.<\/p>\n<p>As c\u00e9lulas podem estar vivas ou fixas, dependendo da aplica\u00e7\u00e3o, e as c\u00e9lulas individuais podem ser classificadas fisicamente usando um cit\u00f4metro.<\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria<\/strong>\u00a0desempenhou um papel crucial no avan\u00e7o das fronteiras da biologia, medicina e tecnologia.<\/p>\n<p>Embora o termo &#8220;<strong>citometria<\/strong>&#8221; possa ser aplicado a qualquer m\u00e9todo usado para extrair informa\u00e7\u00f5es quantitativas de c\u00e9lulas individuais, os exemplos mais comuns s\u00e3o citometria de fluxo e citometria de imagem, que s\u00e3o principalmente m\u00e9todos \u00f3pticos.<\/p>\n<p><strong>Citometria de fluxo &#8211; O que \u00e9<\/strong><\/p>\n<p style=\"text-align: center;\"><img decoding=\"async\" class=\"size-medium wp-image-163825 aligncenter\" src=\"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/wp-content\/uploads\/2022\/08\/Criome1-300x127.jpg\" alt=\"\" width=\"300\" height=\"127\" srcset=\"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/wp-content\/uploads\/2022\/08\/Criome1-300x127.jpg 300w, https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/wp-content\/uploads\/2022\/08\/Criome1.jpg 553w\" sizes=\"(max-width: 300px) 100vw, 300px\" \/><strong>Criometria<\/strong><\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria de fluxo<\/strong>\u00a0\u00e9 geralmente usada para analisar c\u00e9lulas individuais em uma suspens\u00e3o e \u00e9 comum em imunologia e hematopatologia.<\/p>\n<p>As caracter\u00edsticas da\u00a0<strong>citometria de fluxo<\/strong>\u00a0s\u00e3o a velocidade de an\u00e1lise, a sensibilidade de detec\u00e7\u00e3o, a capacidade de medir muitos par\u00e2metros simultaneamente e a capacidade de classificar c\u00e9lulas individuais.<\/p>\n<p>As tend\u00eancias recentes na tecnologia de citometria de fluxo incluem espectroscopia de c\u00e9lula \u00fanica, espectrometria de massa de c\u00e9lula \u00fanica, gera\u00e7\u00e3o de imagens de c\u00e9lulas individuais em fluxo e o desenvolvimento de pequenos cit\u00f4metros de fluxo e classificadores de baixo custo.<\/p>\n<p><strong>Citometria de fluxo &#8211; Defini\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria de fluxo<\/strong>\u00a0\u00e9 um m\u00e9todo de classifica\u00e7\u00e3o e medi\u00e7\u00e3o de tipos de c\u00e9lulas por marca\u00e7\u00e3o fluorescente de marcadores na superf\u00edcie das c\u00e9lulas.<\/p>\n<p>\u00c9 por vezes referido como Classifica\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas ativadas fluorescentes<\/p>\n<p><strong>Citometria de fluxo &#8211; Prop\u00f3sito<\/strong><\/p>\n<p>A an\u00e1lise de citometria de fluxo \u00e9 mais frequentemente usada clinicamente para ajudar a determinar o tipo de leucemia ou linfoma que um paciente tem e para avaliar o progn\u00f3stico.<\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria de fluxo<\/strong>\u00a0\u00e9 bastante sens\u00edvel; \u00e9 capaz de detectar tipos de c\u00e9lulas raros e n\u00edveis residuais de doen\u00e7a.<\/p>\n<p><strong>Citometria de fluxo &#8211; Precau\u00e7\u00f5es<\/strong><\/p>\n<p>Drogas, como ester\u00f3ides, que suprimem o sistema imunol\u00f3gico afetar\u00e3o o n\u00famero de gl\u00f3bulos brancos na amostra do paciente.<\/p>\n<p><strong>Citometria de fluxo &#8211; Descri\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n<p>O m\u00e9dico selecionar\u00e1 uma amostra com base no tipo de c\u00e2ncer que o paciente acredita ter. No caso de linfoma, a amostra pode ser coletada por pun\u00e7\u00e3o aspirativa por agulha fina, ent\u00e3o a amostra de tecido ser\u00e1 separada em c\u00e9lulas \u00fanicas. A an\u00e1lise da leucemia exigir\u00e1 que o paciente forne\u00e7a uma amostra de sangue.<\/p>\n<p>A amostra de sangue do paciente ser\u00e1 separada e os gl\u00f3bulos vermelhos removidos. A amostra ser\u00e1 misturada com uma variedade de anticorpos diferentes que podem interagir com marcadores na superf\u00edcie das c\u00e9lulas.<\/p>\n<p>Diferentes tipos de c\u00e9lulas t\u00eam marcadores caracter\u00edsticos em suas superf\u00edcies celulares, de modo que um determinado tipo de c\u00e9lula pode ser identificado pelos anticorpos que se ligam a ela.<\/p>\n<p>Os anticorpos s\u00e3o rotulados para que emitam luz fluorescente (brilho) \u00e0 medida que passam pelo feixe de laser no cit\u00f4metro.<\/p>\n<p>O\u00a0<strong>cit\u00f4metro<\/strong>\u00a0tamb\u00e9m mede o tamanho da c\u00e9lula e algumas informa\u00e7\u00f5es sobre o interior da c\u00e9lula. O m\u00e9dico utiliza essas informa\u00e7\u00f5es para determinar o tipo espec\u00edfico de leucemia, como miel\u00f3ide ou linfoc\u00edtica, o que, por sua vez, ajuda a determinar o tipo de tratamento que ser\u00e1 mais adequado ao paciente.<\/p>\n<p>A an\u00e1lise da amostra tamb\u00e9m pode ser realizada usando um tipo mais complexo de cit\u00f4metro de fluxo combinado com um microsc\u00f3pio, chamado cit\u00f4metro de varredura a laser.<\/p>\n<p>Este instrumento \u00e9 semelhante a um cit\u00f4metro de fluxo normal, mas \u00e9 mais capaz de analisar amostras de tumores s\u00f3lidos.<\/p>\n<p><strong>Citometria de fluxo &#8211; Prepara\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria de fluxo<\/strong>\u00a0geralmente \u00e9 realizada em sangue, fluidos corporais ou medula \u00f3ssea. Na maioria dos casos, nenhuma prepara\u00e7\u00e3o especial \u00e9 necess\u00e1ria.<\/p>\n<p>Se a aspira\u00e7\u00e3o da medula \u00f3ssea for necess\u00e1ria ou uma bi\u00f3psia de um tumor s\u00f3lido for necess\u00e1ria, o paciente deve ser preparado adequadamente para esses procedimentos. No entanto, a citometria de fluxo em si n\u00e3o requer nenhuma prepara\u00e7\u00e3o adicional por parte do paciente.<\/p>\n<p><strong>Citometria de fluxo &#8211; Cuidados posteriores e riscos<\/strong><\/p>\n<p>Os \u00fanicos cuidados posteriores e riscos associados \u00e0 an\u00e1lise por citometria de fluxo s\u00e3o aqueles associados ao procedimento de coleta da amostra. A an\u00e1lise celular em si n\u00e3o requer esfor\u00e7o ou risco do paciente.<\/p>\n<p><strong>Resultados normais:\u00a0<\/strong>Um resultado normal indicar\u00e1 que n\u00e3o h\u00e1 aumento no n\u00famero de qualquer tipo particular de c\u00e9lula imune. O patologista ver\u00e1 v\u00e1rios tipos diferentes de c\u00e9lulas, mas nenhum tipo estar\u00e1 presente em maior n\u00famero.<\/p>\n<p><strong>Citometria de fluxo &#8211; Resultados anormais<\/strong><\/p>\n<p>Se os resultados forem anormais, o patologista observar\u00e1 um n\u00famero incomumente grande de um tipo de c\u00e9lula em particular.<\/p>\n<p>Os tipos de marcadores presentes na c\u00e9lula dar\u00e3o mais informa\u00e7\u00f5es sobre o tipo de leucemia ou linfoma e poder\u00e3o indicar o progn\u00f3stico do paciente. Por exemplo, c\u00e9lulas leuc\u00eamicas que possuem marcadores normalmente encontrados em tipos de c\u00e9lulas menos maduras podem sugerir um progn\u00f3stico pior e, portanto, uma terapia mais agressiva pode ser recomendada.<\/p>\n<p><strong>An\u00e1lise de citometria de fluxo &#8211; Defini\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n<p>A\u00a0<strong>an\u00e1lise de citometria de fluxo<\/strong>\u00a0\u00e9 a classifica\u00e7\u00e3o de popula\u00e7\u00f5es de c\u00e9lulas com base na an\u00e1lise de dispers\u00e3o de luz e fluoresc\u00eancia facilitada por um laser.<\/p>\n<p>As c\u00e9lulas s\u00e3o contadas e analisadas \u00e0 medida que passam individualmente pela \u00e1rea de contagem criada por uma bainha l\u00edquida que flui pelo laser. As c\u00e9lulas espalham a luz do laser; a dispers\u00e3o direta e em \u00e2ngulo reto s\u00e3o medidas para determinar o tamanho e a granularidade. Este gr\u00e1fico de dispers\u00e3o de luz inicial (dot plot) \u00e9 usado para selecionar uma popula\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas espec\u00edfica para teste usando anticorpos espec\u00edficos ligados covalentemente a corantes fluorescentes. O laser excita o fluorocromo fazendo com que ele emita luz vis\u00edvel, para que as c\u00e9lulas ligadas ao corante possam ser detectadas.<\/p>\n<p><strong>An\u00e1lise de citometria de fluxo &#8211; Prop\u00f3sito<\/strong><\/p>\n<p>Princ\u00edpios de citometria de fluxo s\u00e3o incorporados em alguns analisadores hematol\u00f3gicos automatizados para determinar a contagem de reticul\u00f3citos (est\u00e1gio que precede um gl\u00f3bulo vermelho maduro) e a porcentagem de cada tipo de gl\u00f3bulo branco (contagem diferencial automatizada). Cit\u00f4metros de fluxo s\u00e3o instrumentos especializados que podem medir subpopula\u00e7\u00f5es de c\u00e9lulas espec\u00edficas no sangue, aspirados de medula \u00f3ssea, fluidos corporais e tecidos.<\/p>\n<p><strong>A citometria de fluxo tem muitas aplica\u00e7\u00f5es, incluindo:<\/strong><\/p>\n<p>Contagem de subpopula\u00e7\u00f5es de linf\u00f3citos para avalia\u00e7\u00e3o da fun\u00e7\u00e3o imunol\u00f3gica e estados de imunodefici\u00eancia. O n\u00famero de linf\u00f3citos B, T e NK pode ser contado por citometria de fluxo para avaliar o estado imunol\u00f3gico celular de uma pessoa.<\/p>\n<p>As c\u00e9lulas T auxiliares e supressoras podem ser contadas para auxiliar no diagn\u00f3stico e estadiamento de pessoas com doen\u00e7a por HIV.<\/p>\n<p>Contagem de gl\u00f3bulos brancos imaturos (blastos) para determinar a linhagem celular. A linhagem celular deve ser definida para classificar adequadamente as leucemias agudas e cr\u00f4nicas e os linfomas n\u00e3o Hodgkin.<\/p>\n<p>Testes de citometria de fluxo para marcadores de superf\u00edcie em gl\u00f3bulos brancos precoces para determinar a linhagem celular (linf\u00f3ide vs miel\u00f3ide) e para determinar o est\u00e1gio de matura\u00e7\u00e3o celular.<\/p>\n<p>Determinar o conte\u00fado de DNA das c\u00e9lulas. As c\u00e9lulas malignas geralmente possuem um teor de DNA anormalmente alto. A determina\u00e7\u00e3o do conte\u00fado de DNA, chamada de an\u00e1lise de ploidia, \u00e9 usada para investigar popula\u00e7\u00f5es de c\u00e9lulas tumorais. As c\u00e9lulas de tecidos s\u00f3lidos (por exemplo, tecido mam\u00e1rio) podem ser transformadas em suspens\u00e3o e analisadas.<\/p>\n<p>Classificando fisicamente as subpopula\u00e7\u00f5es de c\u00e9lulas aplicando uma carga eletrost\u00e1tica \u00e0s c\u00e9lulas e usando um dispositivo de coleta de fluido para colh\u00ea-las de got\u00edculas que passam pela c\u00e2mara de fluxo.<\/p>\n<p>Avalia\u00e7\u00e3o de trombocitopenia autoimune, rejei\u00e7\u00e3o de transplante e doen\u00e7as autoimunes.<\/p>\n<p><strong>An\u00e1lise de citometria de fluxo &#8211; Precau\u00e7\u00f5es<\/strong><\/p>\n<p>Precau\u00e7\u00f5es universais para a preven\u00e7\u00e3o da transmiss\u00e3o de pat\u00f3genos transmitidos pelo sangue s\u00e3o observadas ao coletar e processar sangue, medula \u00f3ssea, fluidos corporais e tecidos para an\u00e1lise de citometria de fluxo. Amostras de sangue ou aspirado de medula \u00f3ssea podem ser submetidas em heparina s\u00f3dica (tubo superior verde), EDTA (tubo superior lavanda) ou ACD (tubo superior amarelo). Destes, o anticoagulante preferido \u00e9 a heparina s\u00f3dica. A heparina de l\u00edtio e outros anticoagulantes n\u00e3o s\u00e3o usados.<\/p>\n<p>Linfonodos ou outros esp\u00e9cimes de tecido n\u00e3o s\u00e3o colocados no fixador. Devem ser apresentados frescos, em solu\u00e7\u00e3o salina isot\u00f4nica ou meio de transporte.<\/p>\n<p>As amostras devem ser mantidas \u00e0 temperatura ambiente se a an\u00e1lise for feita dentro de 24 horas. Caso contr\u00e1rio, a amostra deve ser refrigerada, mas n\u00e3o congelada.<\/p>\n<p><strong>An\u00e1lise de citometria de fluxo &#8211; Descri\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n<p>Um\u00a0<strong>cit\u00f4metro de fluxo<\/strong>\u00a0consiste em uma fonte de luz laser, c\u00e2mara de medi\u00e7\u00e3o de fluxo e um sistema \u00f3ptico que consiste em lentes, filtros e detectores de luz. Dois tubos fotomultiplicadores (detectores de luz), um a 180 graus e outro a 90 graus do laser, s\u00e3o usados para medir a dispers\u00e3o direta e em \u00e2ngulo reto, respectivamente. Tr\u00eas detectores de fluoresc\u00eancia, cada um consistindo de um filtro e um tubo fotomultiplicador, s\u00e3o usados para detectar a fluoresc\u00eancia. Os tr\u00eas detectores detectam fluoresc\u00eancia verde, laranja e vermelha.<\/p>\n<p>As c\u00e9lulas s\u00e3o identificadas pela l\u00f3gica de classifica\u00e7\u00e3o aplicada a todos os cinco sinais do detector usando um computador.<\/p>\n<p>Uma an\u00e1lise t\u00edpica de sangue \u00e9 realizada medindo-se primeiro o \u00e2ngulo reto e a dispers\u00e3o de luz direta das c\u00e9lulas. O gr\u00e1fico de dispers\u00e3o resultante \u00e9 usado para identificar o port\u00e3o de contagem, um conjunto de par\u00e2metros usados para selecionar uma subpopula\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas para um estudo mais aprofundado. A \u00e1rea fechada do gr\u00e1fico de dispers\u00e3o \u00e9 a por\u00e7\u00e3o na qual as c\u00e9lulas de interesse s\u00e3o encontradas.<\/p>\n<p>Os par\u00e2metros do port\u00e3o s\u00e3o selecionados para que apenas esta subpopula\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas seja relatada em estudos de fluoresc\u00eancia subsequentes.<\/p>\n<p>Partes da amostra s\u00e3o tratadas com dois anticorpos monoclonais, cada um espec\u00edfico para um ant\u00edgeno de superf\u00edcie celular. Cada anticorpo monoclonal \u00e9 covalentemente ligado a um diferente.<\/p>\n<p><strong>Citometria de imagem<\/strong><\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria de imagem<\/strong>\u00a0\u00e9 geralmente usada para a an\u00e1lise multiparam\u00e9trica de c\u00e9lulas aderentes individuais e \u00e9 usada para medir muitos dos mesmos par\u00e2metros da citometria de fluxo. A citometria de imagem, no entanto, carrega a capacidade adicional de imagem tridimensional. &#8220;An\u00e1lise de alto conte\u00fado&#8221; \u00e9 um termo frequentemente aplicado \u00e0 citometria de imagem no contexto de triagem de alto rendimento, enquanto &#8220;citometria tecidual&#8221; refere-se \u00e0 aplica\u00e7\u00e3o dessas t\u00e9cnicas a c\u00e9lulas in situ. A citometria de imagem \u00e9 geralmente realizada usando microscopia automatizada e processamento e an\u00e1lise de imagem computacional.<\/p>\n<p>As tend\u00eancias recentes em citometria de imagem incluem imagens de alta velocidade, imagens de super-resolu\u00e7\u00e3o, citometria de imagem cin\u00e9tica e aprendizado de m\u00e1quina para an\u00e1lise e interpreta\u00e7\u00e3o de imagens.<\/p>\n<p>A\u00a0<strong>citometria de imagem<\/strong>\u00a0\u00e9 a forma mais antiga de citometria. Cit\u00f4metros de imagem operam por imagem est\u00e1tica de um grande n\u00famero de c\u00e9lulas usando microscopia \u00f3ptica. Antes da an\u00e1lise, as c\u00e9lulas s\u00e3o comumente coradas para aumentar o contraste ou para detectar mol\u00e9culas espec\u00edficas, rotulando-as com fluorocromos. Tradicionalmente, as c\u00e9lulas s\u00e3o visualizadas dentro de um hemocit\u00f4metro para auxiliar na contagem manual.<\/p>\n<p>Desde a introdu\u00e7\u00e3o da c\u00e2mera digital, em meados da d\u00e9cada de 1990, o n\u00edvel de automa\u00e7\u00e3o dos cit\u00f4metros de imagem aumentou constantemente.<\/p>\n<p>Isso levou \u00e0 disponibilidade comercial de cit\u00f4metros de imagem automatizados, desde simples contadores de c\u00e9lulas at\u00e9 sofisticados sistemas de triagem de alto conte\u00fado.<\/p>\n<p style=\"text-align: center;\"><img fetchpriority=\"high\" decoding=\"async\" class=\"size-medium wp-image-163826 aligncenter\" src=\"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/wp-content\/uploads\/2022\/08\/Criome2-293x300.jpg\" alt=\"\" width=\"293\" height=\"300\" srcset=\"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/wp-content\/uploads\/2022\/08\/Criome2-293x300.jpg 293w, https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/wp-content\/uploads\/2022\/08\/Criome2.jpg 368w\" sizes=\"(max-width: 293px) 100vw, 293px\" \/><strong>Citometria de fluxo<\/strong><\/p>\n<p><strong>Fonte:<\/strong>\u00a0isac-net.org\/en.wikipedia.org\/www.encyclopedia.com<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Criometria &#8211; O que \u00e9 A\u00a0citometria\u00a0\u00e9 a medi\u00e7\u00e3o do n\u00famero e caracter\u00edsticas das c\u00e9lulas. 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