{"id":148562,"date":"2020-06-04T15:55:09","date_gmt":"2020-06-04T17:55:09","guid":{"rendered":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/?p=148562"},"modified":"2020-06-04T15:55:09","modified_gmt":"2020-06-04T17:55:09","slug":"microscopio-de-fluorescencia","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/ciencias-da-natureza\/biologia\/microscopio-de-fluorescencia","title":{"rendered":"Microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia"},"content":{"rendered":"

Defini\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n

Um\u00a0microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia<\/strong>\u00a0\u00e9 praticamente o mesmo que um microsc\u00f3pio de luz convencional com recursos adicionais para aprimorar suas capacidades.<\/p>\n

A\u00a0microscopia de fluoresc\u00eancia\u00a0\u00e9 uma t\u00e9cnica de imagem que visualiza a poss\u00edvel fluoresc\u00eancia do material analisado ou, no caso de mais de uma esp\u00e9cie presente, visualiza o contraste na fluoresc\u00eancia emitida.<\/p>\n

O que \u00e9 um microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia?<\/strong><\/p>\n

Um\u00a0microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia\u00a0\u00e9 um microsc\u00f3pio usado para examinar amostras com propriedades luminescentes ou amostras que foram preparadas com subst\u00e2ncias que criam propriedades luminescentes.<\/p>\n

Nesse tipo de microscopia, o pr\u00f3prio esp\u00e9cime \u00e9 a fonte de luz. Uma grande quantidade de informa\u00e7\u00f5es pode ser coletada com o uso de um\u00a0microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia, e esses microsc\u00f3pios tamb\u00e9m podem ser usados para criar imagens impressionantes nas quais estruturas detalhadas s\u00e3o claramente vis\u00edveis.<\/p>\n

Esses microsc\u00f3pios aproveitam as propriedades de certos compostos qu\u00edmicos. Quando excitados pela luz do comprimento de onda adequado, luz ultravioleta cl\u00e1ssica, esses produtos qu\u00edmicos acendem.<\/p>\n

Se a luminesc\u00eancia \u00e9 breve, \u00e9 conhecida como fluoresc\u00eancia, enquanto um per\u00edodo mais prolongado de luminesc\u00eancia ap\u00f3s a excita\u00e7\u00e3o \u00e9 chamado de fosforesc\u00eancia.<\/p>\n

Nos dois casos, a cor da luminesc\u00eancia variar\u00e1, dependendo dos produtos qu\u00edmicos envolvidos, assim como a dura\u00e7\u00e3o exata do per\u00edodo de luminesc\u00eancia.<\/p>\n

Em um\u00a0microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia, a luz de um comprimento de onda espec\u00edfico \u00e9 passada atrav\u00e9s de um condensador de microsc\u00f3pio especializado que focaliza a luz em um feixe muito estreito.<\/p>\n

Quando a luz atinge a amostra, os compostos luminescentes ficam excitados e come\u00e7am a emitir luz. Com o uso de um espelho dicroico que filtra o feixe de luz usado para excitar a amostra, o pesquisador pode ver claramente a luminesc\u00eancia e fazer anota\u00e7\u00f5es sobre suas propriedades, ou tirar uma fotografia da amostra no est\u00e1gio do microsc\u00f3pio para refer\u00eancia futura.<\/p>\n

Como a luz usada em um\u00a0microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia\u00a0costuma ser potencialmente perigosa para os olhos, geralmente \u00e9 necess\u00e1rio o uso de um filtro polarizador na ocular, para que os olhos do usu\u00e1rio n\u00e3o sejam danificados pelo microsc\u00f3pio. Os filtros polarizadores tamb\u00e9m podem ser usados para corre\u00e7\u00e3o de cores ou para aumentar o contraste, de modo que a luminesc\u00eancia seja mais claramente vis\u00edvel. Como em outros microsc\u00f3pios, a nitidez da imagem pode ser ajustada focando os componentes do microsc\u00f3pio, e o n\u00edvel de amplia\u00e7\u00e3o tamb\u00e9m pode ser aumentado ou diminu\u00eddo conforme necess\u00e1rio.<\/p>\n

Em alguns casos, uma amostra pode ser naturalmente luminescente, como no caso de alguns minerais que fluorescem ou fosforescem sob a luz de um comprimento de onda espec\u00edfico.<\/p>\n

As amostras tamb\u00e9m podem ser marcadas com mol\u00e9culas conhecidas como fluor\u00f3foros. Essas mol\u00e9culas podem atingir estruturas espec\u00edficas dentro da amostra, criando uma imagem fluorescente de estruturas dignas de nota quando a amostra \u00e9 excitada pela luz no microsc\u00f3pio.<\/p>\n

O que \u00e9 um microsc\u00f3pio fluorescente?<\/strong><\/p>\n

Um\u00a0microsc\u00f3pio fluorescente\u00a0\u00e9 um dispositivo usado para examinar a quantidade e o tipo de\u00a0fluoresc\u00eancia\u00a0emitida por uma amostra.<\/p>\n

Ao contr\u00e1rio de um microsc\u00f3pio convencional, um\u00a0microsc\u00f3pio fluorescente\u00a0cria imagens leg\u00edveis atrav\u00e9s do uso de irradia\u00e7\u00e3o e filtra\u00e7\u00e3o, em vez da reflex\u00e3o tradicional.<\/p>\n

Esse tipo de microsc\u00f3pio \u00e9 uma ferramenta vital na pesquisa celular e gen\u00e9tica, inclusive na produ\u00e7\u00e3o de imagens tridimensionais de micr\u00f3bios.<\/p>\n

A\u00a0fluoresc\u00eancia\u00a0\u00e9 um fen\u00f4meno que ocorre quando um material fica excitado, ou mais ativo, pela exposi\u00e7\u00e3o \u00e0 radia\u00e7\u00e3o. \u00c0 medida que o material come\u00e7a a se acalmar, a energia criada pela excita\u00e7\u00e3o \u00e9 emitida como luz. Em algumas subst\u00e2ncias, a\u00a0fluoresc\u00eancia\u00a0\u00e9 uma propriedade natural, o que significa que n\u00e3o \u00e9 necess\u00e1ria irradia\u00e7\u00e3o externa para causar a emiss\u00e3o de luz.<\/p>\n

Outras subst\u00e2ncias n\u00e3o s\u00e3o naturalmente fluorescentes, mas podem se tornar assim quando excitadas pelo comprimento de onda correto da luz.<\/p>\n

Um\u00a0microsc\u00f3pio fluorescente\u00a0\u00e9 o principal meio de excitar e observar esses materiais.<\/p>\n

Em um\u00a0microsc\u00f3pio fluorescente, uma amostra pode ser atingida com luz selecionada especificamente para criar fluoresc\u00eancia. Usando um filtro, o microsc\u00f3pio permite que apenas o comprimento de onda escolhido chegue \u00e0 amostra, a fim de garantir a melhor rea\u00e7\u00e3o. A fonte de luz usada para criar\u00a0fluoresc\u00eancia\u00a0pode variar, dependendo do tipo de microsc\u00f3pio fluorescente e amostra. Uma das fontes de luz mais comuns usadas na microscopia fluorescente \u00e9 uma l\u00e2mpada de vapor de merc\u00fario, que cria uma luz extremamente brilhante.<\/p>\n

Outro tipo de luz frequentemente usado \u00e9 a l\u00e2mpada de arco de xen\u00f4nio, que produz uma luz semelhante \u00e0 luz do dia. Em algumas situa\u00e7\u00f5es, os lasers, em vez das luzes tradicionais, podem ser usados.<\/p>\n

Depois que a amostra \u00e9 excitada, um segundo filtro se torna necess\u00e1rio para bloquear o comprimento de onda inicial da luz. Conhecido como um divisor de feixe, esse filtro reflete a luz em um comprimento de onda menor do que o usado para excitar a amostra. Isso significa que a imagem criada no microsc\u00f3pio n\u00e3o ser\u00e1 contaminada pela fonte de luz inicial, pois a luz de comprimento de onda maior passar\u00e1 pelo divisor de feixe. Assim, a imagem final criada refletir\u00e1 apenas a luz fluorescente da pr\u00f3pria amostra.<\/p>\n

O\u00a0microsc\u00f3pio fluorescente\u00a0tem muitas aplica\u00e7\u00f5es diferentes em todo o mundo cient\u00edfico.<\/p>\n

Na maioria das vezes, \u00e9 usado no estudo de c\u00e9lulas e micro-organismos, pois pode identificar detalhes espec\u00edficos em pequenas amostras com alto grau de precis\u00e3o e clareza.<\/p>\n

Pesquisadores m\u00e9dicos e biol\u00f3gicos frequentemente usam\u00a0microscopia fluorescente\u00a0para estudar DNA e RNA, aprender sobre o comportamento e detalhes estruturais das c\u00e9lulas e estudar anticorpos para entender melhor a doen\u00e7a.<\/p>\n

Por que a microscopia de fluoresc\u00eancia \u00e9 \u00fatil?<\/strong><\/p>\n

A\u00a0microscopia de fluoresc\u00eancia\u00a0\u00e9 altamente sens\u00edvel, espec\u00edfica, confi\u00e1vel e amplamente utilizada pelos cientistas para observar a localiza\u00e7\u00e3o das mol\u00e9culas nas c\u00e9lulas e das c\u00e9lulas nos tecidos.<\/p>\n

A imagem por fluoresc\u00eancia \u00e9 razoavelmente suave na amostra, o que facilita a visualiza\u00e7\u00e3o de mol\u00e9culas e processos din\u00e2micos nas c\u00e9lulas vivas.<\/p>\n

Em\u00a0microsc\u00f3pios de fluoresc\u00eancia\u00a0convencionais, o feixe de luz penetra em toda a profundidade da amostra, permitindo imagens f\u00e1ceis de sinais intensos e estudos de co-localiza\u00e7\u00e3o com fluor\u00f3foros multicoloridos na mesma amostra.<\/p>\n

A\u00a0microscopia de fluoresc\u00eancia\u00a0pode, no entanto, limitar a localiza\u00e7\u00e3o precisa das mol\u00e9culas de fluoresc\u00eancia, pois qualquer luz fora de foco ser\u00e1 coletada.<\/p>\n

Isso pode ser resolvido usando t\u00e9cnicas de super-resolu\u00e7\u00e3o, que contornam o poder de resolu\u00e7\u00e3o limitada da microscopia de fluoresc\u00eancia convencional, que n\u00e3o consegue distinguir objetos com menos de 200 nm de dist\u00e2ncia.<\/p>\n

Microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia – Hist\u00f3ria<\/strong><\/p>\n

Otto Heimstaedt e Heinrich Lehmann (1911-1913) desenvolveram os primeiros microsc\u00f3pios de fluoresc\u00eancia como resultado do microsc\u00f3pio UV (1901-1904).<\/p>\n

O instrumento foi utilizado para investigar a autofluoresc\u00eancia de bact\u00e9rias, protozo\u00e1rios, tecidos de plantas e animais e subst\u00e2ncias bio-org\u00e2nicas, como albumina, elastina e queratina.<\/p>\n

\"Microsc\u00f3pio
\nStanislav Von Prowazek<\/strong><\/p>\n

Stanislav Von Prowazek<\/strong>\u00a0(1914) empregou o\u00a0microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia\u00a0<\/strong>para estudar a liga\u00e7\u00e3o do corante \u00e0s c\u00e9lulas vivas.<\/p>\n

\"Microsc\u00f3pio
\nMicrosc\u00f3pios de fluoresc\u00eancia s\u00e3o usados em pesquisas celulares e gen\u00e9ticas<\/strong><\/p>\n

\"Microsc\u00f3pio
\nMicrosc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia<\/strong><\/p>\n

Fonte:<\/strong>\u00a0oni.bio\/www.microscopyu.com\/www.leica-microsystems.com\/www.sciencedirect.com\/www.wisegeek.org\/di.uq.edu.au\/www.ncbi.nlm.nih.gov\/fluorescence-foundation.org<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

Defini\u00e7\u00e3o Um\u00a0microsc\u00f3pio de fluoresc\u00eancia\u00a0\u00e9 praticamente o mesmo que um microsc\u00f3pio de luz convencional com recursos adicionais para aprimorar suas capacidades. A\u00a0microscopia de fluoresc\u00eancia\u00a0\u00e9 uma t\u00e9cnica de imagem que visualiza a poss\u00edvel fluoresc\u00eancia do material analisado ou, no caso de mais de uma esp\u00e9cie presente, visualiza o contraste na fluoresc\u00eancia emitida. 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