{"id":133480,"date":"2018-04-23T11:37:25","date_gmt":"2018-04-23T13:37:25","guid":{"rendered":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/?p=133480"},"modified":"2018-04-23T11:37:25","modified_gmt":"2018-04-23T13:37:25","slug":"espectrofotometro","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisconovo\/ciencias-da-natureza\/quimica\/espectrofotometro","title":{"rendered":"Espectrofot\u00f4metro"},"content":{"rendered":"

Defini\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n

Instrumento usado para medir a intensidade dos comprimentos de onda em um espectro de luz em compara\u00e7\u00e3o com a intensidade da luz de uma fonte padr\u00e3o.<\/p>\n

Dispositivo para medir o brilho das v\u00e1rias por\u00e7\u00f5es de espectros.<\/p>\n

O que \u00e9 um Espectrofot\u00f4metro?<\/strong><\/p>\n

Um\u00a0espectrofot\u00f4metro<\/strong>\u00a0\u00e9 um dos instrumentos cient\u00edficos comumente encontrados em muitos laborat\u00f3rios de pesquisa e industriais.<\/p>\n

Espectrofot\u00f4metros\u00a0<\/strong>s\u00e3o usados para pesquisa em f\u00edsica, biologia molecular, qu\u00edmica e laborat\u00f3rios de bioqu\u00edmica. Normalmente, o nome refere-se \u00e0 Espectroscopia Vis\u00edvel por Ultravioleta.<\/p>\n

A energia da luz depende do seu comprimento de onda, geralmente designado por lambda (a d\u00e9cima primeira letra do alfabeto grego). Embora o espectro eletromagn\u00e9tico se estenda ao longo de uma enorme variedade de comprimentos de onda, a maioria dos laborat\u00f3rios s\u00f3 pode medir uma pequena fra\u00e7\u00e3o deles.<\/p>\n

A\u00a0espectroscopia vis\u00edvel por ultravioleta<\/strong>\u00a0mede entre 200 e 400 nan\u00f4metros (nm) para medi\u00e7\u00f5es de luz UV e at\u00e9 aproximadamente 750 nm no espectro vis\u00edvel.<\/p>\n

Para a\u00a0espectroscopia vis\u00edvel por ultravioleta<\/strong>, as amostras s\u00e3o geralmente contidas e medidas em pequenos recipientes chamados cubetas. Estes podem ser de pl\u00e1stico se usados no espectro vis\u00edvel, mas precisam ser de quartzo ou s\u00edlica fundida se usados para medi\u00e7\u00f5es de UV. Existem algumas m\u00e1quinas que podem utilizar tubos de ensaio de vidro.<\/p>\n

Espectroscopia Vis\u00edvel \u00e9 frequentemente utilizada industrialmente para colorimetria. Usando este m\u00e9todo, as amostras s\u00e3o medidas em m\u00faltiplos comprimentos de onda de 400-700 nm, e seus perfis de absorb\u00e2ncia s\u00e3o comparados a um padr\u00e3o. Essa t\u00e9cnica \u00e9 freq\u00fcentemente usada por fabricantes de t\u00eaxteis e de tinta.<\/p>\n

Outros usu\u00e1rios comerciais da\u00a0espectroscopia vis\u00edvel por ultravioleta<\/strong>\u00a0incluem laborat\u00f3rios e impressoras forenses.<\/p>\n

Na pesquisa biol\u00f3gica e qu\u00edmica, as solu\u00e7\u00f5es s\u00e3o frequentemente quantificadas medindo seu grau de absor\u00e7\u00e3o de luz em um determinado comprimento de onda.<\/p>\n

Um valor chamado coeficiente de extin\u00e7\u00e3o \u00e9 usado para calcular a concentra\u00e7\u00e3o do composto. Por exemplo, os laborat\u00f3rios de biologia molecular usam\u00a0espectrofot\u00f4metros<\/strong>\u00a0para medir as concentra\u00e7\u00f5es de amostras de DNA ou RNA. Eles \u00e0s vezes t\u00eam uma m\u00e1quina avan\u00e7ada chamada espectrofot\u00f4metro NanoDrop \u2122 que usa uma fra\u00e7\u00e3o da quantidade de amostra comparada \u00e0quela usada pelos espectrofot\u00f4metros tradicionais.<\/p>\n

Para que a quantifica\u00e7\u00e3o seja v\u00e1lida, a amostra deve obedecer \u00e0 Lei de Beer-Lambert. Isso requer que a absorb\u00e2ncia seja diretamente proporcional ao comprimento do caminho da cubeta e \u00e0 absor\u00e7\u00e3o do composto. Existem tabelas de coeficientes de extin\u00e7\u00e3o dispon\u00edveis para muitos, mas n\u00e3o todos, compostos.<\/p>\n

Muitas rea\u00e7\u00f5es qu\u00edmicas e enzim\u00e1ticas mudam de cor ao longo do tempo, e os\u00a0espectrofot\u00f4metros<\/strong>\u00a0s\u00e3o muito \u00fateis para medir essas mudan\u00e7as.<\/p>\n

Por exemplo, as enzimas polifenol oxidase que causam frutos a marrom oxidam solu\u00e7\u00f5es de compostos fen\u00f3licos, alterando solu\u00e7\u00f5es claras para aquelas que s\u00e3o visivelmente coloridas. Tais rea\u00e7\u00f5es podem ser avaliadas medindo-se o aumento da absorb\u00e2ncia \u00e0 medida que a cor muda. Idealmente, a taxa de mudan\u00e7a ser\u00e1 linear e \u00e9 poss\u00edvel calcular as taxas a partir desses dados.<\/p>\n

\"Espectrofot\u00f4metro\"
\nUm\u00a0espectrofot\u00f4metro<\/strong>\u00a0mais avan\u00e7ado ter\u00e1 um suporte de cubeta com temperatura controlada para realizar as rea\u00e7\u00f5es em uma temperatura precisa ideal para a enzima.<\/p>\n

Laborat\u00f3rios de microbiologia e biologia molecular freq\u00fcentemente usam um espectrofot\u00f4metro para medir o crescimento de culturas de bact\u00e9rias.<\/p>\n

Os experimentos de clonagem de DNA s\u00e3o freq\u00fcentemente feitos em bact\u00e9rias, e os pesquisadores precisam medir o est\u00e1gio de crescimento da cultura para saber quando realizar certos procedimentos. Eles medem a absorb\u00e2ncia, que \u00e9 conhecida como densidade \u00f3ptica, em um espectrofot\u00f4metro. Pode-se dizer a partir da densidade \u00f3ptica se as bact\u00e9rias est\u00e3o se dividindo ativamente ou se est\u00e3o come\u00e7ando a morrer.<\/p>\n

Espectrofot\u00f4metros<\/strong>\u00a0usam uma fonte de luz para brilhar uma matriz de comprimentos de onda atrav\u00e9s de um monocromador. Este dispositivo, ent\u00e3o, transmite uma faixa estreita de luz, e o espectrofot\u00f4metro compara a intensidade da luz que passa pela amostra at\u00e9 a passagem por um composto de refer\u00eancia.<\/p>\n

Por exemplo, se um composto \u00e9 dissolvido em etanol, a refer\u00eancia seria o etanol. O resultado \u00e9 exibido como o grau de absor\u00e7\u00e3o da diferen\u00e7a entre eles. Isto indica a absorv\u00eancia do composto da amostra.<\/p>\n

A raz\u00e3o para essa absor\u00e7\u00e3o \u00e9 que tanto a luz ultravioleta quanto a vis\u00edvel t\u00eam energia suficiente para excitar as subst\u00e2ncias qu\u00edmicas para n\u00edveis de energia maiores. Esta excita\u00e7\u00e3o resulta em um maior comprimento de onda, que \u00e9 vis\u00edvel quando a absorb\u00e2ncia \u00e9 plotada contra o comprimento de onda.<\/p>\n

Mol\u00e9culas diferentes ou compostos inorg\u00e2nicos absorvem energia em diferentes comprimentos de onda. Aqueles com absor\u00e7\u00e3o m\u00e1xima na faixa vis\u00edvel s\u00e3o vistos como coloridos pelo olho humano.<\/p>\n

As solu\u00e7\u00f5es dos compostos podem ser claras, mas absorver na faixa UV. Tais compostos geralmente possuem liga\u00e7\u00f5es duplas ou an\u00e9is arom\u00e1ticos. \u00c0s vezes, h\u00e1 um ou mais picos detect\u00e1veis quando o grau de absor\u00e7\u00e3o \u00e9 plotado em rela\u00e7\u00e3o ao comprimento de onda. Em caso afirmativo, isso pode ajudar na identifica\u00e7\u00e3o de alguns compostos, comparando a forma da parcela com a de gr\u00e1ficos de refer\u00eancia conhecidos.<\/p>\n

Existem dois tipos de m\u00e1quinas\u00a0espectrofot\u00f4metro<\/strong>\u00a0vis\u00edvel por ultravioleta, feixe \u00fanico e feixe duplo. Estes diferem em como eles medem a intensidade da luz entre a amostra de refer\u00eancia e teste. As m\u00e1quinas de feixe duplo medem a refer\u00eancia e o composto de teste simultaneamente, enquanto as m\u00e1quinas de feixe \u00fanico medem antes e depois da adi\u00e7\u00e3o do composto de teste.<\/p>\n

O que \u00e9 um espectrofot\u00f4metro UV?<\/strong><\/p>\n

\"Espectrofot\u00f4metro\"\"\"
\nEspectrofot\u00f4metro UV<\/strong><\/p>\n

Um\u00a0espectrofot\u00f4metro UV<\/strong>\u00a0\u00e9 um dispositivo usado para estudar a intera\u00e7\u00e3o entre radia\u00e7\u00e3o e mat\u00e9ria em rela\u00e7\u00e3o ao comprimento de onda dos f\u00f3tons.<\/p>\n

Especificamente, mede a luz vis\u00edvel e a faixa pr\u00f3xima ao vis\u00edvel das faixas de espectro ultravioleta e infravermelho. O dispositivo permite que um usu\u00e1rio identifique transi\u00e7\u00f5es eletr\u00f4nicas dentro das v\u00e1rias regi\u00f5es do espectro eletromagn\u00e9tico.<\/p>\n

A luz UV pode ser medida por um\u00a0espectrofot\u00f4metro<\/strong>\u00a0mais prontamente quando estiver na regi\u00e3o de 400 a 700 nan\u00f4metros (nm) para quantificar e determinar as caracter\u00edsticas da percep\u00e7\u00e3o de cores. Essencialmente, o dispositivo permite que os cientistas tomem medidas sobre a capacidade do olho e da mente humana de isolar comprimentos de onda espec\u00edficos que definem as cores. O estudo das cores dentro da faixa perceptiva humana \u00e9 conhecido como colorimetria.<\/p>\n

Tradicionalmente, um\u00a0espectrofot\u00f4metro<\/strong>\u00a0n\u00e3o consegue detectar fluoresc\u00eancia. Isso requer um componente adicional conhecido como mecanismo fluorescente bi- espectral. Sem essa habilidade, \u00e9 dif\u00edcil gerenciar corretamente as imagens coloridas, especificamente se a cor cont\u00e9m algum tipo de fluoresc\u00eancia.<\/p>\n

Um\u00a0espectrofot\u00f4metro UV<\/strong>\u00a0\u00e9 configurado em dois formatos diferentes, conhecidos como d \/ 8, uma an\u00e1lise esf\u00e9rica e 0\/45, uma an\u00e1lise de linha reta. Ambas as designa\u00e7\u00f5es s\u00e3o voltadas para identificar o padr\u00e3o geom\u00e9trico espec\u00edfico da fonte de luz, bem como o ambiente do objeto. Al\u00e9m disso, leva em conta o que um observador veria naturalmente ao observar a coloriza\u00e7\u00e3o.<\/p>\n

Uma vantagem para este dispositivo \u00e9 o fato de que ele pode identificar os n\u00edveis exatos de compostos dentro de uma determinada amostra de espectro. Por exemplo, se analisa uma fotografia, deve ser capaz de identificar os diferentes componentes de cor de cada se\u00e7\u00e3o da imagem. Cada cor e satura\u00e7\u00e3o da cor \u00e9 identific\u00e1vel.<\/p>\n

A lei de Beer-Lambert afirma que cores diferentes tamb\u00e9m s\u00e3o afetadas pelos materiais pelos quais a luz viaja. Isso ter\u00e1 profunda influ\u00eancia nos dados anal\u00edticos do espectrofot\u00f4metro. Devido a este fato, a absor\u00e7\u00e3o de luz em materiais espec\u00edficos pode ter resultados divergentes.<\/p>\n

A ind\u00fastria de impress\u00e3o usa extensivamente\u00a0espectrofot\u00f4metros<\/strong>\u00a0UV para garantir que a cor correta seja colocada em um produto. A fabrica\u00e7\u00e3o de tinta depende da tecnologia para garantir que a composi\u00e7\u00e3o de tinta de base produza a cor correta quando colocada em papel ou caixas. O dispositivo tamb\u00e9m continua monitorando os resultados quando ocorre a impress\u00e3o real. Tomando leituras ao longo do espectro de 10 a 20 nm em luz vis\u00edvel, o espectrofot\u00f4metro pode identificar a produ\u00e7\u00e3o da curva de reflet\u00e2ncia espectral, radia\u00e7\u00e3o refletida da superf\u00edcie de um objeto.<\/p>\n

Quais s\u00e3o os usos para um espectrofot\u00f4metro?<\/strong><\/p>\n

Um\u00a0espectrofot\u00f4metro<\/strong>\u00a0\u00e9 usado em qu\u00edmica para determinar a quantidade de um analito presente em uma amostra, medindo o grau de absor\u00e7\u00e3o e \/ ou emiss\u00e3o de radia\u00e7\u00e3o em um espectro pr\u00e9-selecionado.<\/p>\n

Basicamente, voc\u00ea tem o seguinte processo:<\/strong><\/p>\n

Uma fonte de radia\u00e7\u00e3o emite e direciona as ondas eletromagn\u00e9ticas em dire\u00e7\u00e3o a um dispositivo que seleciona uma faixa de freq\u00fc\u00eancia e somente distribuir\u00e1 ondas dentro da faixa requerida.
\nEste dispositivo, conhecido como dispositivo de sele\u00e7\u00e3o espectral, direciona a radia\u00e7\u00e3o adequada para a amostra.
\nA amostra absorve a radia\u00e7\u00e3o.
\nDependendo do tipo de espectrofot\u00f4metro, o grau de absor\u00e7\u00e3o e \/ ou emiss\u00e3o de radia\u00e7\u00e3o \u00e9 medido por um detector, que emite um pulso el\u00e9trico correspondente.
\nUm dispositivo de leitura interpreta o pulso do detector e envia os resultados usando o display anal\u00f3gico ou digital.<\/p><\/blockquote>\n

Quais s\u00e3o os diferentes tipos de espectrofot\u00f4metros?<\/strong><\/p>\n

Existem duas classifica\u00e7\u00f5es principais de espectrofot\u00f4metro.<\/p>\n

Eles s\u00e3o:<\/strong>\u00a0feixe \u00fanico e feixe duplo.<\/p>\n

Um\u00a0espectrofot\u00f4metro de feixe duplo<\/strong>\u00a0compara a intensidade da luz entre 2 trajetos de luz, um caminho contendo a amostra de refer\u00eancia e o outro a amostra de teste.<\/p>\n

Um\u00a0espectrofot\u00f4metro de feixe \u00fanico<\/strong>\u00a0mede a intensidade de luz relativa do feixe antes e depois da introdu\u00e7\u00e3o da amostra de teste.<\/p><\/blockquote>\n

Mesmo assim, os instrumentos de feixe duplo s\u00e3o mais f\u00e1ceis e mais est\u00e1veis para medi\u00e7\u00f5es de compara\u00e7\u00e3o, os instrumentos de feixe \u00fanico podem ter uma grande faixa din\u00e2mica e tamb\u00e9m s\u00e3o simples de manusear e mais compactos.<\/p>\n

Resumo<\/strong><\/p>\n

Um arco-\u00edris \u00e9 a coisa mais linda de se ver, mas se n\u00e3o fosse pela luz e como ela se comporta, n\u00f3s n\u00e3o poder\u00edamos ver isso. Pingos de chuva funcionam como um prisma, dividindo a luz branca combinada do sol em todas as cores vis\u00edveis do espectro de luz.<\/p>\n

Mas mesmo as cores de coisas simples, como uma folha, por exemplo, t\u00eam a ver com comprimentos de onda de luz. Cada cor na luz tem um comprimento de onda diferente, ent\u00e3o quando a luz atinge um objeto, alguns comprimentos de onda s\u00e3o absorvidos, e outros s\u00e3o refletidos de volta. N\u00f3s s\u00f3 vemos as cores refletidas. Uma folha verde s\u00f3 aparece verde porque todas as outras cores foram absorvidas.<\/p>\n

\u00c9 esse mesmo princ\u00edpio de cor e comprimento de onda que um\u00a0espectrofot\u00f4metro<\/strong>\u00a0\u00e9 baseado.<\/p>\n

Um\u00a0espectrofot\u00f4metro<\/strong>\u00a0\u00e9 um instrumento especial que mede a quantidade de luz que uma subst\u00e2ncia absorve. Toda subst\u00e2ncia ir\u00e1 transmitir (refletir de volta) e absorver a luz de maneira ligeiramente diferente. Assim como a impress\u00e3o digital identifica cada ser humano individualmente, saber exatamente quanto vermelho (ou verde, ou azul, etc.) \u00e9 absorvido nos permite identificar e quantificar diferentes materiais.<\/p>\n

Ent\u00e3o, como funciona um espectrofot\u00f4metro?<\/strong><\/p>\n

Uma solu\u00e7\u00e3o de amostra \u00e9 colocada dentro do espectrofot\u00f4metro.
\nUma fonte de luz ilumina a amostra.
\nUm dispositivo chamado monocromador divide a luz em cada cor, ou melhor, comprimentos de onda individuais (assim como uma gota de chuva faz um arco-\u00edris). Uma fenda ajust\u00e1vel permite apenas um comprimento de onda espec\u00edfico atrav\u00e9s da solu\u00e7\u00e3o da amostra.
\nO comprimento de onda da luz atinge a amostra, que \u00e9 mantida em um pequeno recipiente chamado cuvete. Precisamos ter cuidado ao manusear as cuvetes; at\u00e9 mesmo uma pequena impress\u00e3o digital pode interferir nos resultados.
\nSeja qual for a luz que passa pela amostra, ela \u00e9 lida e exibida na tela de sa\u00edda.<\/p><\/blockquote>\n

Fonte:<\/strong>\u00a0www.spectrophotometer.com\/www.wisegeek.org\/study.com\/www.quora.com\/www.innovateus.net<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

Defini\u00e7\u00e3o Instrumento usado para medir a intensidade dos comprimentos de onda em um espectro de luz em compara\u00e7\u00e3o com a intensidade da luz de uma fonte padr\u00e3o. Dispositivo para medir o brilho das v\u00e1rias por\u00e7\u00f5es de espectros. O que \u00e9 um Espectrofot\u00f4metro? 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