{"id":19212,"date":"2015-11-26T00:00:00","date_gmt":"2015-11-26T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisco\/uncategorized\/microscopio-optico-3\/"},"modified":"2026-09-01T15:21:00","modified_gmt":"2026-09-01T15:21:00","slug":"microscopio-optico-3","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisco\/biologia-2\/microscopio-optico-3\/","title":{"rendered":"Microsc\u00f3pio \u00d3ptico"},"content":{"rendered":"\nMicrosc\u00f3pio \u00d3ptico – O que \u00e9<\/strong>\n\nO\u00a0Microsc\u00f3pio \u00d3ptico<\/strong>\u00a0ou\u00a0Microsc\u00f3pio de Luz<\/strong>, assim chamado porque ele emprega a luz vis\u00edvel para detectar objetos pequenos, \u00e9 provavelmente a ferramenta de pesquisa mais conhecida e bem-utilizado em biologia. No entanto, muitos alunos e professores n\u00e3o t\u00eam conhecimento de toda a gama de recursos que est\u00e3o dispon\u00edveis em microsc\u00f3pios de luz.\n\nComo o custo de um instrumento aumenta com a sua qualidade e versatilidade, os melhores instrumentos s\u00e3o, infelizmente, indispon\u00edvel para a maioria dos programas acad\u00eamicos. No entanto, at\u00e9 mesmo os mais baratos microsc\u00f3pios \u0093para estudantes\u0094 pode fornecer uma vista espetacular sobre a natureza e pode capacitar os alunos a realizar algumas experi\u00eancias razoavelmente sofisticadas.\n\nA capacidade de ver, separados ou distintos, dois objetos que se encontram muito pr\u00f3ximos um do outro, depende do grau de contraste entre eles e do poder resolvente do processo de vis\u00e3o.\n\nNo caso do olho humano, desarmado e em condi\u00e7\u00f5es \u00f3timas de vis\u00e3o, o limite de resolu\u00e7\u00e3o \u00e9 cerca de 0,1 mm.\n\nIsto significa que, se dois objetos est\u00e3o separados por uma dist\u00e2ncia inferior a 0,1 mm, eles apresentar-se-\u00e3o como um \u00fanico objeto.\n\nComo a c\u00e9lula, pelas suas dimens\u00f5es, n\u00e3o permite uma observa\u00e7\u00e3o a olho nu, o seu estudo e o das suas partes componentes tem de efetuar-se com a ajuda de um instrumento como o microsc\u00f3pio.\n\nAs partes essenciais do microsc\u00f3pio \u00f3ptico comum s\u00e3o:<\/strong>\n
1)<\/strong>\u00a0uma fonte luminosa\n2)\u00a0<\/strong>um sistema de lentes (condensador) para captar e focar a luz no esp\u00e9cime\n3)<\/strong>\u00a0uma objetiva para formar e ampliar a imagem do esp\u00e9cime; e 4) uma ocular para ampliar a imagem formada pela objetiva.<\/blockquote>\nNa figura seguinte est\u00e1 representado um microsc\u00f3pio \u00f3ptico com os seus diferentes componentes.\n

\"Microsc\u00f3pio\nEsquema de um microsc\u00f3pio \u00f3ptico<\/strong><\/p>\nPara fazer uma correta observa\u00e7\u00e3o do material a examinar deve adoptar-se o seguinte procedimento:<\/strong>\n

1)\u00a0<\/strong>Ligar a fonte luminosa.\n2)<\/strong>\u00a0Colocar a prepara\u00e7\u00e3o a observar na platina.\n3)<\/strong>\u00a0Com o aux\u00edlio do condensador e do diafragma obter uma boa ilumina\u00e7\u00e3o.\n4)<\/strong>\u00a0Rodando a cremalheira aproximar a objetiva de 10x o mais perto poss\u00edvel da prepara\u00e7\u00e3o.\n5)\u00a0<\/strong>Rodando novamente a cremalheira, puxar a objetiva de 10x para cima at\u00e9 obter uma imagem n\u00edtida do esp\u00e9cime.\n6)\u00a0<\/strong>Depois da prepara\u00e7\u00e3o estar focada com a objetiva de 10x focar com a objetiva de 40x. Com o aux\u00edlio do parafuso microm\u00e9trico podem-se obter diferentes planos das estruturas a observar.\n7) Caso seja necess\u00e1rio recorrer a uma amplia\u00e7\u00e3o mais elevada ( objetiva de 100x ) proceder do seguinte modo:<\/strong>\u00a0afastar a objetiva de 40x e, sobre a prepara\u00e7\u00e3o, colocar uma gota de \u00f3leo de imers\u00e3o. Em seguida, com o aux\u00edlio do parafuso microm\u00e9trico, focar com a objetiva de 100x. Quando se utiliza o \u00f3leo de imers\u00e3o deve evitar-se o seu contato com as objetivas de 10 e 40x.<\/blockquote>\nMicrosc\u00f3pio \u00d3ptico – Instrumento<\/strong>\n\nO\u00a0microsc\u00f3pio<\/strong>\u00a0\u00e9 um instrumento\u00a0\u00f3tico<\/strong>\u00a0de amplia\u00e7\u00e3o utilizado para observa\u00e7\u00e3o de objetos pr\u00f3ximos, t\u00e3o pequenos ( 0,1 a 10um) que n\u00e3o podem ser vistos nitidamente pelo olho humano desarmado (di\u00e2metro inferior a 0,1 mm, a uma dist\u00e2ncia de 25 cm).\n\nEm 1674, o holand\u00eas Antonie van LEEUWENHOEK descreveu pela primeira vez os microrganismos, observado atrav\u00e9s de lentes polidas por ele.\n\nOs\u00a0microsc\u00f3pios<\/strong>\u00a0s\u00e3o classificados em\u00a0\u00f3pticos e eletr\u00f4nicos<\/strong>, dependendo do princ\u00edpio no qual a amplia\u00e7\u00e3o \u00e9 baseada.\n\nO microsc\u00f3pio eletr\u00f4nico emprega um feixe de el\u00e9trons para produzir uma imagem ampliada.\n\nO\u00a0microsc\u00f3pio \u00f3ptico ou luminoso<\/strong>\u00a0(emprega ondas luminosas) comumente usado \u00e9 composto, porque apresenta dois sistemas de lentes \u0096 ocular, que fica pr\u00f3ximo ao olho do observador e aquele que fica pr\u00f3ximo \u00e0 prepara\u00e7\u00e3o a ser observada, objetiva. A microscopia \u00f3ptica inclui a M. luminosa (uso do microsc\u00f3pio \u00f3tico comum), M. de campo escuro, M. de fase, M. de fluoresc\u00eancia e Microscopia ultravioleta. Na microscopia luminosa, o campo microsc\u00f3pico ou \u00e1rea observada aparece brilhantemente iluminado e os objetos estudados se apresentam mais escuros.\n\nO microsc\u00f3pio \u00f3ptico ou luminoso comp\u00f5e-se de:<\/strong>\u00a0base, coluna, cuja extremidade superior articula-se com um tubo met\u00e1lico, conhecido por canh\u00e3o, que sustenta os sistemas de lentes \u0096 oculares (embutida num \u00fanico tubo \u0096 monocular ou em dois tubos \u0096 binocular) e objetivas (a seco de 5, 10, 40, 45 X ou de imers\u00e3o 90 ou 100X), montadas num dispositivo chamado rev\u00f3lver).\n\nUm sistema de cremalheira permite o deslocamento do canh\u00e3o (em outros microsc\u00f3pios, desloca-se a mesa ou platina contendo a prepara\u00e7\u00e3o) para baixo e para cima pelo giro dos parafusos macrom\u00e9trico (fazem deslocamentos r\u00e1pidos e de grande amplitude) e microm\u00e9trico (movimentos m\u00ednimos e lentos), permitindo a aproxima\u00e7\u00e3o das objetivas \u00e0 prepara\u00e7\u00e3o a ser visualizada; \u0096 condensadores e diafragma que regulam a intensidade da ilumina\u00e7\u00e3o; mesa ou platina, onde \u00e9 colocada a l\u00e2mina com a prepara\u00e7\u00e3o; Charriot, parafusos que permitem movimenta\u00e7\u00e3o da l\u00e2mina nos sentidos laterais, anterior e posterior.\n\nO sistema de ilumina\u00e7\u00e3o \u00e9 constitu\u00eddo de espelho ou l\u00e2mpada e filtro. O poder de resolu\u00e7\u00e3o (PR) de um microsc\u00f3pio \u00f3ptico, i.e. a capacidade de distinguir n\u00edtida e separadamente dois pontos adjacentes, \u00e9 fun\u00e7\u00e3o do comprimento de onda (400 a 700nm) da luz utilizada e da abertura num\u00e9rica ou AN (express\u00e3o matem\u00e1tica do cone de luz projetado sobre o objeto em exame e recebido pela objetiva).\n\nQuanto maior a AN de uma objetiva, maior ser\u00e1 seu PR.\n\nA AN \u00e9 fun\u00e7\u00e3o do di\u00e2metro da lente da objetiva e de sua dist\u00e2ncia focal. A AN de um sistema \u00f3ptico pode ser aumentada usando-se um condensador adequado. O cone de luz \u00e9 influenciado pelo \u00edndice de refra\u00e7\u00e3o (n) do meio, representado pelo ar (n=1) ou \u00f3leo de imers\u00e3o (n=1,56) e vidro da l\u00e2mina (n=1,5). As ondas de luz que atravessam um meio uniforme, p. ex., ar ou vidro, seguem uma trajet\u00f3ria em linha reta. Por outro lado, o percurso das ondas de luz \u00e9 desviado quando elas passam de um meio a outro com \u00edndices de refra\u00e7\u00e3o diferentes. Deste modo, parte da luz que emerge de uma l\u00e2mina (n=1,50), para o ar (n=1,00) acima da mesma, \u00e9 refratada da dire\u00e7\u00e3o do eixo da objetiva, perdendo-se. Mas, se o meio acima da l\u00e2mina tiver o mesmo \u00edndice de refra\u00e7\u00e3o do vidro da l\u00e2mina, os raios de luz deixam a l\u00e2mina sem refra\u00e7\u00e3o, seguindo diretamente para a objetiva, aumentando-se portanto, o PR. Isto \u00e9 o que ocorre quando usamos o \u00f3leo de cedro (imers\u00e3o), que tem \u00edndice de refra\u00e7\u00e3o pr\u00f3ximo ao do vidro, na observa\u00e7\u00e3o de prepara\u00e7\u00f5es coradas examinadas com objetiva de imers\u00e3o. As objetivas a seco tem \u00edndice de refra\u00e7\u00e3o pr\u00f3ximo de 1,0. O uso de filtros permitem modificar o comprimento de onda, usualmente reduzindo-o, para obter melhor PR.\n\nO limite de resolu\u00e7\u00e3o, i.e., o menor objeto que pode ser visto com nitidez, \u00e9 obtido com o menor comprimento de onda da luz v\u00edsivel e com objetiva de maior abertura num\u00e9rica.\n\nAssim:<\/strong>\n
\n

Comprimento de onda da luz em nm ou um<\/p>\n\n

PR = \u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0096<\/h3>\n

\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 ANobjetiva\u00a0\u00a0 +\u00a0\u00a0 ANcondensador<\/p>\n<\/blockquote>\nExemplo:\u00a0<\/strong>Supondo um microsc\u00f3pio com filtro verde adaptado resultando um comprimento de onda de 550nm; a objetiva de imers\u00e3o tem uma AN de 1,25 e o condensador, de 0,9.\n

\u00a0 550 nm<\/p>\n\n

PR =\u00a0 \u0097\u0097\u0097\u0097\u0097\u0096 =\u00a0 255 nm = 0,255um<\/h3>\n

\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 1,25\u00a0 +\u00a0 0,9<\/p>\nO menor objeto que pode ser visto neste microsc\u00f3pio luminoso \u00e9 o que apresenta um di\u00e2metro de, aproximadamente, 0,2um. Aumentos acima do PR n\u00e3o seriam adequados, pois a imagem, embora maior, seria menos distinta e com apar\u00eancia pouco n\u00edtida, reduzindo tamb\u00e9m a \u00e1rea vis\u00edvel (campo).\n\nComo p\u00f4de ser visto, o PR do microsc\u00f3pio \u00f3ptico em condi\u00e7\u00f5es ideais \u00e9 de cerca de metade do comprimento da onda de luz utilizada.\n\nO aumento total de um microsc\u00f3pio \u00e9 dado pela multiplica\u00e7\u00e3o do poder de aumento da objetiva pelo da ocular. As oculares usadas nos laborat\u00f3rios apresentam valores de 6, 8, 10 e 16.\n\nAs objetivas apresentam aumentos de 2,5, 3,6, 5,0, 10, 40, 45 (objetivas a seco), 90 e 100 (objetivas de imers\u00e3o, distinguidas das demais por possuir um anel fino de cor preta em sua extremidade).\n\nAssim, uma lente objetiva com o poder de aumentar um objeto 100 vezes, associada a uma ocular com o poder de amplia\u00e7\u00e3o de 10 vezes, aumentaria o esp\u00e9cime 1000 vezes.\n\nPortanto, part\u00edculas com 0,2 um de di\u00e2metro s\u00e3o ampliadas at\u00e9 0,2 mm, tornando-se vis\u00edveis.\n\nMicrosc\u00f3pio \u00d3ptico – Microsc\u00f3pio de Luz<\/strong>\n\nO\u00a0microsc\u00f3pio \u00f3ptico<\/strong>, muitas vezes referido como o \u0093microsc\u00f3pio de luz<\/strong>\u0093, \u00e9 um tipo de microsc\u00f3pio que utiliza a luz vis\u00edvel e um sistema de lentes para ampliar imagens de amostras pequenas.\n\nMicrosc\u00f3pios \u00f3pticos<\/strong>\u00a0s\u00e3o o design mais antigo do microsc\u00f3pio e foram projetados por volta de 1600.\n\nMicrosc\u00f3pios \u00f3pticos\u00a0<\/strong>b\u00e1sicos podem ser muito simples, embora haja muitos projetos complexos que visam melhorar resolu\u00e7\u00e3o e o contraste.\n\nMicrosc\u00f3pios \u00f3pticos<\/strong>\u00a0historicamente eram f\u00e1ceis de desenvolver e s\u00e3o populares porque usam a luz vis\u00edvel para a amostra pode ser diretamente observado por olho.\n\nMicroscopia \u00d3ptica<\/strong>\n

\"Microsc\u00f3pioMicroscopia \u00d3ptica<\/strong><\/p>\nConfigura\u00e7\u00e3o \u00f3tica na qual o esp\u00e9cime fica localizado em frente ao plano focal da objetiva e a luz transmitida atrav\u00e9s da imagem, ou refletida da por\u00e7\u00e3o central do esp\u00e9cime em observa\u00e7\u00e3o, produz raios paralelos que se projetam pelo eixo \u00f3ptico do microsc\u00f3pio at\u00e9 as lentes (oculares).\n\nA por\u00e7\u00e3o de luz que chega at\u00e9 a objetiva, origin\u00e1ria da periferia do esp\u00e9cime em observa\u00e7\u00e3o, \u00e9 conduzida atrav\u00e9s das lentes do tubo e ent\u00e3o focada numa imagem plana intermedi\u00e1ria, que \u00e9 ent\u00e3o ampliada pelas oculares.\n\nPartes de um Microsc\u00f3pio \u00d3ptico (\u00d3tico)<\/strong>\n\nMec\u00e2nica<\/strong>\n

1.\u00a0<\/strong>Base ou p\u00e9\u00a02.\u00a0<\/strong>Bra\u00e7o\n3.<\/strong>\u00a0Tubo ou canh\u00e3o\n4.\u00a0<\/strong>Rev\u00f3lver\n5.\u00a0<\/strong>Mesa ou platina\n6.<\/strong>\u00a0charriot\n7.<\/strong>\u00a0Parafusos macrom\u00e9trico e microm\u00e9trico<\/blockquote>\n\u00d3ptica<\/strong>\n
Fonte de luz\nCondensador\nDiafragma\nFiltro Oculares\nObjetivas<\/blockquote>\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n\n

USO DO MICROSC\u00d3PIO \u00d3TICO<\/strong><\/h4>\n1. <\/strong>Verificar a voltagem e ligar o equipamento \u00e0 rede el\u00e9trica.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n2. <\/strong>Acender a l\u00e2mpada do sistema de ilumina\u00e7\u00e3o.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n3. <\/strong>Abrir totalmente o diafragma e colocar o sistema condensador – diafragma na posi\u00e7\u00e3o mais elevada, pois \u00e9 a que permite melhor ilumina\u00e7\u00e3o.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n4.<\/strong> Movimentar o rev\u00f3lver, colocando em posi\u00e7\u00e3o a objetiva de menor aumento (4X).\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n5. <\/strong>Colocar a l\u00e2mina na platina, com a prepara\u00e7\u00e3o para cima, fixando-a \u00e0 platina.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n6. <\/strong>Movimentar o charriot, fazendo com que o esfrega\u00e7o fique em baixo da objetiva.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n7.<\/strong> Com o parafuso macrom\u00e9trico, elevar a platina ao m\u00e1ximo, observando que a objetiva n\u00e3o toque na l\u00e2mina ou lam\u00ednula, pois poder\u00e1 quebr\u00e1-la.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n8. <\/strong>Focalizar a prepara\u00e7\u00e3o para a obten\u00e7\u00e3o de uma imagem n\u00edtida, movimentando o bot\u00e3o macrom\u00e9trico para baixo at\u00e9 que se possa visualizar a imagem.\n\n9. <\/strong>Ajustar o foco com o bot\u00e3o microm\u00e9trico.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n10. <\/strong>Colocar a regi\u00e3o do esfrega\u00e7o que se quer observar bem no centro do campo visual da objetiva.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n11. <\/strong>Movimentar o rev\u00f3lver, colocando em posi\u00e7\u00e3o a objetiva seguinte (10x).\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n11.<\/strong> Uma vez que se tenha obtido o foco com a objetiva anterior (4 x) acertar o foco na objetiva de 10 x apenas com o bot\u00e3o microm\u00e9trico.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n12. <\/strong>Repetir a opera\u00e7\u00e3o com a objetiva de 40 x.\n\n13. <\/strong>A objetiva de 100 x \u00e9 chamada de imers\u00e3o. Movimentar o rev\u00f3lver de forma que a objetiva de 100 x fique a meia dist\u00e2ncia da posi\u00e7\u00e3o de encaixe. Colocar uma gota do \u00f3leo de imers\u00e3o sobre a prepara\u00e7\u00e3o.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n13.1 <\/strong>Movimentar o rev\u00f3lver de forma que a objetiva de 100 x encaixe corretamente. Ajustar o foco com o bot\u00e3o microm\u00e9trico.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n14. <\/strong>Finalizado a observa\u00e7\u00e3o microsc\u00f3pica, desligar a l\u00e2mpada, girar o rev\u00f3lver de forma a encaixar a objetiva de 4 x, baixar a platina, retirar a l\u00e2mina e enxugar a objetiva de 100 x com papel fino (N\u00c3O ESFREGAR A LENTE).\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n15. <\/strong>Desligar o equipamento da tomada, colocar a s\u00edlica sobre a platina e cobrir totalmente o microsc\u00f3pio.\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\n

\"Microsc\u00f3pio<\/p>\nFonte:<\/strong>\u00a0www.geocities.com\/www.microbiologia.ufba.br\/recife.ifpe.edu.br\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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