{"id":19030,"date":"2015-11-24T00:00:00","date_gmt":"2015-11-24T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisco\/uncategorized\/enzimas-de-restricao-3\/"},"modified":"2026-09-01T15:19:42","modified_gmt":"2026-09-01T15:19:42","slug":"enzimas-de-restricao-3","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/lab.fabricadelandings.com.br\/portalsaofrancisco\/biologia-2\/enzimas-de-restricao-3\/","title":{"rendered":"Enzimas de Restri\u00e7\u00e3o"},"content":{"rendered":"\n \n\nAs\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o\u00a0<\/strong>s\u00e3o qualquer um de um grupo das enzimas que degradam mol\u00e9culas de DNA ou RNA quebrando liga\u00e7\u00f5es dentro das cadeias polinucleot\u00eddica, para processamento de genes na tecnologia de DNA recombinante e para mapeamento de cromossomos.s.\n\nUma enzima de restri\u00e7\u00e3o \u00e9 uma prote\u00edna que reconhece uma sequ\u00eancia de nucleot\u00eddeos curta e espec\u00edfica e corta o DNA apenas naquele local espec\u00edfico, que \u00e9 conhecido como local de restri\u00e7\u00e3o ou sequ\u00eancia alvo\n\nEndonuclease de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\u00a0\u00e9 uma enzima de bact\u00e9rias que pode reconhecer sequ\u00eancias de bases espec\u00edficas no DNA e cortar (restringir) o DNA naquele local (o local de restri\u00e7\u00e3o).\n\nTamb\u00e9m chamada de\u00a0enzima de restri\u00e7\u00e3o.<\/strong>\n\nO que s\u00e3o<\/strong>\n\nAs\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\u00a0s\u00e3o\u00a0enzimas de corte de DNA<\/b>\u00a0encontrados em bact\u00e9rias (e colhidas a partir deles para uso). Porque eles cortam dentro da mol\u00e9cula, que s\u00e3o muitas vezes chamado de\u00a0endonucleases de restri\u00e7\u00e3o.<\/b>\n\nA fim de ser capaz de sequenciar o DNA, \u00e9 primeiro necess\u00e1rio cort\u00e1-la em fragmentos menores. Muitas enzimas que digerem DNA (como aqueles em seu fluido pancre\u00e1tico) pode fazer isso, mas a maioria deles n\u00e3o servem para o trabalho de seq\u00fc\u00eancia porque eles cortaram cada mol\u00e9cula de forma aleat\u00f3ria.\n\nIsto produz uma cole\u00e7\u00e3o heterog\u00e9nea de fragmentos de tamanhos variados.\n\nO que \u00e9 necess\u00e1rio \u00e9 um meio para clivar a mol\u00e9cula de ADN em alguns locais precisamente localizadas de modo que um pequeno conjunto de fragmentos homog\u00e9neos s\u00e3o produzidos.\n\nAs ferramentas para isso s\u00e3o as endonucleases de restri\u00e7\u00e3o. A mais raro o local em que reconhece, quanto menor for o n\u00famero de pe\u00e7as produzidas por uma determinada endonuclease de restri\u00e7\u00e3o.\n\nAs enzimas de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\n\nAs\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\u00a0s\u00e3o\u00a0endonucleases<\/strong>\u00a0que podem ser purificadas a partir de bact\u00e9rias e que reconhecem sequ\u00eancias espec\u00edficas, com 4 a 8pb, clivando em seguida as duas cadeias de DNA nesse mesmo s\u00edtio; essas sequ\u00eancias designam-se por s\u00edtio de restri\u00e7\u00e3o e s\u00e3o normalmente curtas sequ\u00eancias palindr\u00f3micas, isto \u00e9, a sequ\u00eancia do s\u00edtio de restri\u00e7\u00e3o \u00e9 a mesma em ambas as cadeias quando estas s\u00e3o ?lidas? no sentido 5? ? 3?.\n\nOs locais de clivagem s\u00e3o portanto definidos pela sequ\u00eancia de nucleot\u00eddeos, e \u00e9 portanto esta que define o tamanho dos fragmentos obtidos.\n\nAs diferentes enzimas de restri\u00e7\u00e3o apresentam especificidade para diferentes sequ\u00eancias o que permite escolher a(s) enzima(s) de restri\u00e7\u00e3o necess\u00e1rias para clivar um fragmento de DNA com um determinado gene.\n\nO que \u00e9 uma endonuclease?<\/strong>\n\nUma\u00a0endonuclease<\/strong>\u00a0\u00e9 uma enzima especializada que \u00e9 capaz de quebrar as liga\u00e7\u00f5es entre os \u00e1cidos nucl\u00e9icos em uma cadeia polinucleot\u00eddica, produzindo dois fragmentos.\n\nEssas enzimas podem atuar no DNA e no RNA para cortar de dentro de uma fita.\n\nCertas endonucleases, conhecidas como endonucleases de restri\u00e7\u00e3o, atacam locais espec\u00edficos dentro de fitas de RNA e DNA, reconhecendo sequ\u00eancias particulares.\n\nEssas enzimas s\u00e3o muito valiosas na pesquisa cient\u00edfica, quando as pessoas desejam a capacidade de editar informa\u00e7\u00f5es gen\u00e9ticas, como na engenharia gen\u00e9tica.\n\nEm contraste, uma exonuclease s\u00f3 pode cortar o material gen\u00e9tico no final de uma fita de DNA ou RNA. As endonucleases s\u00e3o usadas por bact\u00e9rias e arqueas como parte de seus mecanismos de defesa.\n\nAlgumas das primeiras observa\u00e7\u00f5es dessas enzimas em a\u00e7\u00e3o v\u00eam de pesquisas com bact\u00e9rias, e as bact\u00e9rias s\u00e3o usadas para produzir endonucleases em grande escala para fins de pesquisa.\n\nDentro de uma bact\u00e9ria, uma endonuclease \u00e9 projetada para repelir ataques virais, cortando DNA estranho de modo que se torne n\u00e3o funcional.\n\nO organismo protege seu pr\u00f3prio DNA das a\u00e7\u00f5es da endonuclease por meio de um processo conhecido como metila\u00e7\u00e3o. A metila\u00e7\u00e3o impede a a\u00e7\u00e3o da endonuclease, garantindo que o DNA do organismo permane\u00e7a intacto. O DNA estranho, no entanto, n\u00e3o tem tanta sorte, e a endonuclease cortar\u00e1 perfeitamente a espinha dorsal do DNA em dois lugares, separando-o para criar fitas separadas. Dependendo de qual endonuclease est\u00e1 envolvida, os eventos podem ser \u201ccontundentes\u201d ou \u201cpegajosos\u201d, referindo-se a onde na fita o DNA ou RNA \u00e9 cortado.\n\nOs pesquisadores podem usar endonucleases de restri\u00e7\u00e3o conhecidas para cortar o DNA em \u00e1reas-alvo desejadas, criando um ponto de inser\u00e7\u00e3o conveniente. Novo material gen\u00e9tico pode ser inserido neste ponto, com o objetivo de estimular a express\u00e3o de um gene inteiramente novo. Isso pode ser usado para fazer coisas como introduzir resist\u00eancia a herbicidas nas lavouras, de modo que os agricultores possam pulverizar os campos para conter as ervas daninhas.\n\nOs laborat\u00f3rios que fabricam endonucleases vendem seus produtos para pesquisadores e outros laborat\u00f3rios. O laborat\u00f3rio descreve as formas pelas quais um produto pode atuar, permitindo aos pesquisadores determinar qual produto seria mais adequado para os usos desejados. Trabalhar com endonucleases pode ser complicado e requer paci\u00eancia e habilidade.\n\nPode-se pensar em uma enzima como uma endonuclease de restri\u00e7\u00e3o como um conjunto de tesouras muito pequeno e muito exigente que pode ser usado para elaborar um projeto, mas tamb\u00e9m pode funcionar mal se n\u00e3o for manuseado corretamente, cortando no local errado ou deixando de cortar.\n\nEnzima de restri\u00e7\u00e3o – Endonuclease de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\n\nEnzima de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>, tamb\u00e9m chamado de endonuclease de restri\u00e7\u00e3o, uma prote\u00edna produzida pela bact\u00e9rias que cliva o DNA em locais espec\u00edficos ao longo da mol\u00e9cula.\n\nNa c\u00e9lula bacteriana, enzimas de restri\u00e7\u00e3o clivam o DNA estranho, eliminando, assim, os organismos infecciosos.\n\nAs enzimas de restri\u00e7\u00e3o pode ser isolado a partir de c\u00e9lulas bacterianas e utilizado no laborat\u00f3rio para manipular os fragmentos de DNA, tais como aqueles que cont\u00eam genes; por esta raz\u00e3o eles s\u00e3o ferramentas indispens\u00e1veis de DNA recombinante tecnologia, ou de engenharia gen\u00e9tica.\n\nUma bact\u00e9ria usa uma enzima de restri\u00e7\u00e3o para se defender contra v\u00edrus bacterianos chamados bacteri\u00f3fagos ou fagos. Quando um fago infecta uma bact\u00e9ria, ele insere o seu DNA na c\u00e9lula bacteriana, de modo que ele pode ser replicado. A enzima de restri\u00e7\u00e3o impede a replica\u00e7\u00e3o do DNA do fago, cortando-a em v\u00e1rios peda\u00e7os.\n\nAs enzimas de restri\u00e7\u00e3o foram nomeados pela sua capacidade para restringir ou limitar o n\u00famero de estirpes de bacteri\u00f3fago que pode infectar uma bact\u00e9ria.\n\nCada enzima de restri\u00e7\u00e3o reconhece uma sequ\u00eancia curta, espec\u00edfica de bases de nucleot\u00eddeos (as quatro subunidades qu\u00edmicas b\u00e1sicas da mol\u00e9cula do DNA-adenina linear de cadeia dupla, citosina, timina, guanina e).\n\nEstas regi\u00f5es s\u00e3o chamados as sequ\u00eancias de reconhecimento e s\u00e3o distribu\u00eddas aleatoriamente ao longo do DNA.\n\nDiferentes bact\u00e9rias esp\u00e9cies fazer enzimas de restri\u00e7\u00e3o que reconhecem diferentes nucleot\u00eddeos seq\u00fc\u00eancias.\n\nQuando uma restri\u00e7\u00e3o de endonuclease reconhece uma sequ\u00eancia, que corta atrav\u00e9s da mol\u00e9cula de DNA, catalisando a hidr\u00f3lise (divis\u00e3o de uma liga\u00e7\u00e3o qu\u00edmica atrav\u00e9s da adi\u00e7\u00e3o de uma mol\u00e9cula de \u00e1gua) da liga\u00e7\u00e3o entre os nucle\u00f3tidos adjacentes. Bact\u00e9rias impedir o seu pr\u00f3prio DNA de ser degradado desta maneira, disfar\u00e7ando suas sequ\u00eancias de reconhecimento.\n\nAs enzimas denominadas metilases adicionar grupos metilo (-CH 3) de adenina ou citosina bases dentro da sequ\u00eancia de reconhecimento, o qual \u00e9, portanto, modificados e protegidas da endonuclease.\n\nA enzima de restri\u00e7\u00e3o e a sua correspondente metilase constituem o sistema de restri\u00e7\u00e3o-modifica\u00e7\u00e3o de uma esp\u00e9cie bacteriana.\n\nExistem tr\u00eas classes de enzimas de restri\u00e7\u00e3o, os tipos designados:<\/strong>\u00a0I, II, e III.\n\nTipos I e III<\/strong>, as enzimas s\u00e3o semelhantes na medida em que tanto a atividade de restri\u00e7\u00e3o e metilase s\u00e3o realizadas por uma grande enzima complexa, em contraste com o sistema de tipo II, em que a enzima de restri\u00e7\u00e3o \u00e9 independente da sua metilase.\n\nTipo II<\/strong>\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o tamb\u00e9m diferem dos outros dois tipos em que clivam o DNA em locais espec\u00edficos dentro do local de reconhecimento; os outros clivar o DNA de forma aleat\u00f3ria, por vezes centenas de bases da sequ\u00eancia de reconhecimento.\n\nEnzima de restri\u00e7\u00e3o – DNA<\/strong>\n\nAs\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\u00a0s\u00e3o usadas em biotecnologia para cortar DNA em cadeias menores, a fim de estudar as diferen\u00e7as de comprimento de fragmentos entre os indiv\u00edduos ou para a clonagem de gene.\n\nAs\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\u00a0(ou endonucleases de restri\u00e7\u00e3o) s\u00e3o enzimas que cortam o DNA em locais espec\u00edficos.\n\nAs enzimas reconhecem determinadas sequencias nucleot\u00eddicas do DNA e fragmentam a mol\u00e9cula sempre que identificam essa sequ\u00eancia, produzindo extremidades coesivas.\n

\"Enzimas\nEnzima de Restri\u00e7\u00e3o – EcoRI<\/strong><\/p>\nAs enzimas de restri\u00e7\u00e3o foram descobertas em bact\u00e9rias que resistiam \u00e0 infec\u00e7\u00e3o dos v\u00edrus (bacteri\u00f3fagos) produzindo enzimas que seccionavam o DNA viral, fragmentando-o em por\u00e7\u00f5es inofensivas.\n\nAs enzimas atuam quando identificam determinadas sequencias especificas – locais de restri\u00e7\u00e3o – geralmente compostas por 4-6 nucle\u00f3tidos.\n\nAs enzimas cortam as liga\u00e7\u00f5es entre o grupo hidroxilo 3\u2019 de um nucle\u00f3tido e o grupo fosfato 5\u2019 do nucle\u00f3tido adjacente.\n\nAs extremidades das cadeias seccionadas – extremidades coesivas – quando contactam com outras resultantes da a\u00e7\u00e3o da mesma enzima podem emparelhar por complementaridade.\n\nTipos<\/strong>\n\nExistem tr\u00eas tipos diferentes de enzimas de restri\u00e7\u00e3o:<\/strong>\n

Tipo I:\u00a0<\/strong>corta o DNA em locais aleat\u00f3rios, tanto quanto mil ou mais pares de bases do local de reconhecimento. Cortes do tipo III de cerca de 25 pares de bases do site. Tipos I e III requerem ATP e pode ser grandes enzimas com m\u00faltiplas subunidades. Enzimas do tipo II, que s\u00e3o predominantemente utilizados na biotecnologia, cortar o ADN dentro da sequ\u00eancia de reconhecimento, sem a necessidade de ATP, e s\u00e3o menores e mais simples.\n\nTipo II:\u00a0<\/strong>enzimas restri\u00e7\u00e3o s\u00e3o nomeados de acordo com a esp\u00e9cie bacteriana a partir do qual eles est\u00e3o isolados. Por exemplo, a enzima Eco RI foi isolado a partir de co li E..\n\nTipo II:<\/strong>\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o pode gerar dois tipos diferentes de cortes, dependendo se eles cortam ambas as cadeias no centro da sequ\u00eancia de reconhecimento, ou cada fio mais perto de uma das extremidades da sequ\u00eancia de reconhecimento. O primeiro corte vai gerar \u201ctermina sem corte\u201d sem sali\u00eancias nucleot\u00eddeos. Este \u00faltimo, gera \u201cpegajoso\u201d ou \u201ccoesa\u201d termina, porque cada fragmento resultante de DNA tem uma sali\u00eancia que complementa os outros fragmentos. Ambos s\u00e3o \u00fateis em gen\u00e9tica molecular para a tomada de ADN recombinante e prote\u00ednas.<\/blockquote>\nResumo<\/strong>\n\nAs\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\u00a0s\u00e3o enzimas que reconhecem sequ\u00eancias de DNA particulares e as clivam, separando uma fita de DNA em duas, onde quer que encontrem as sequ\u00eancias que foram codificadas para reconhecer.\n\nExistem v\u00e1rias aplica\u00e7\u00f5es para enzimas de restri\u00e7\u00e3o, talvez mais notadamente na tecnologia de DNA recombinante, que permite aos cientistas manipular informa\u00e7\u00f5es gen\u00e9ticas. O DNA recombinante \u00e9 usado para tudo, desde o desenvolvimento de produtos terap\u00eauticos como a insulina para tratamento m\u00e9dico at\u00e9 a modifica\u00e7\u00e3o de planta\u00e7\u00f5es.\n\nEssas enzimas s\u00e3o isoladas de bact\u00e9rias. Nas bact\u00e9rias, eles protegem o organismo de DNA estranho, cortando o DNA quando ele \u00e9 reconhecido pelo corpo da bact\u00e9ria.\n\nAs bact\u00e9rias usam uma t\u00e9cnica chamada modifica\u00e7\u00e3o de restri\u00e7\u00e3o para se proteger de suas enzimas de restri\u00e7\u00e3o, garantindo que as enzimas n\u00e3o ativem o DNA da pr\u00f3pria bact\u00e9ria. Como mecanismo de autodefesa, as enzimas de restri\u00e7\u00e3o s\u00e3o excelentes, impedindo a replica\u00e7\u00e3o do DNA estranho no corpo, fragmentando-o.\n\nNumerosas\u00a0enzimas de restri\u00e7\u00e3o<\/strong>\u00a0foram descobertas e mais est\u00e3o sendo constantemente descobertas em um processo conhecido como mapeamento de enzimas de restri\u00e7\u00e3o.\n\nV\u00e1rios laborat\u00f3rios produzem enzimas de restri\u00e7\u00e3o para vender a pesquisadores e outros laborat\u00f3rios. Cada enzima de restri\u00e7\u00e3o foi codificada para responder a uma sequ\u00eancia particular de nucleot\u00eddeos, e a sequ\u00eancia \u00e9 geralmente um pal\u00edndromo, com leitura anterior e posterior. Quando uma enzima de restri\u00e7\u00e3o encontra a sequ\u00eancia que reconhece, ela corta ambas as fitas da estrutura de dupla h\u00e9lice do DNA, separando-a.\n\nEle tamb\u00e9m criar\u00e1 v\u00e1rios fragmentos se identificar mais de uma c\u00f3pia da sequ\u00eancia que conhece.\n\nAlgumas enzimas de restri\u00e7\u00e3o cortam diretamente a dupla h\u00e9lice, criando o que \u00e9 conhecido como extremidades cegas. Outros cortam em pontos diferentes em outros lados, fazendo um corte irregular conhecido como “pontas pegajosas”. Em ambos os casos, uma enzima conhecida como DNA ligase pode ser usada para juntar um peda\u00e7o de DNA ao DNA cortado, desde que as duas por\u00e7\u00f5es tenham extremidades complementares.\n\nEssa t\u00e9cnica pode ser usada para inserir novo DNA em um genoma e para manipular um genoma, como se fosse encaixar as pe\u00e7as de dois quebra-cabe\u00e7as diferentes.\n\nEm alguns casos, uma enzima de restri\u00e7\u00e3o \u00e9 codificada para o que \u00e9 conhecido como reconhecimento inequ\u00edvoco, o que significa que ela reconhece apenas sequ\u00eancias muito espec\u00edficas.\n\nOutros s\u00e3o codificados para reconhecimento amb\u00edguo, procurando por sequ\u00eancias nas quais nucleot\u00eddeos espec\u00edficos se enquadram em quaisquer nucleot\u00eddeos. Usando enzimas de restri\u00e7\u00e3o conhecidas, os pesquisadores podem selecionar seletivamente uma amostra de DNA em fragmentos conhecidos como fragmentos de restri\u00e7\u00e3o.\n\n\"\"\n

Enzimas de restri\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\nFonte:<\/strong>\u00a0www.sciencelearn.org.nz\/www.britannica.com\/med.up.pt\/www.prospecbio.com\/www.bio.miami.edu\/www.wisegeek.org\/www.biologyonline.com\/www.ncbi.nlm.nih.gov\/www.khanacademy.org\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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